【CV】使用 scikit-image 進(jìn)行圖像處理

劃痕試驗(yàn)時間序列分析。
圖像處理在當(dāng)今非常適用,對于2019冠狀病毒疾病,無論是開發(fā)治療方法還是尋找檢測病毒的新方法,都給全球的研究人員帶來了新的挑戰(zhàn)。為了對 2019冠狀病毒進(jìn)行研究,研究人員通常需要對圖像進(jìn)行大量計(jì)算,以檢測有助于得出新見解和結(jié)論的特定元素。
在這篇文章中,我將介紹圖像處理的基礎(chǔ)知識和一個小教程,詳細(xì)介紹如何將圖像處理用于閾值和分割,這是圖像處理中兩種非常強(qiáng)大的技術(shù)。在文章中,我們將使用 scikit-image,因此可能需要 Python 的基本背景知識和一些高等數(shù)學(xué)知識才能完全理解該概念。
除非我們有豐富的生物學(xué)經(jīng)驗(yàn),否則大多數(shù)人可能不知道什么是劃痕試驗(yàn),我將簡要概述什么是劃痕檢測,然后直接進(jìn)入教程。
劃痕試驗(yàn)是生物學(xué)家用來跟蹤細(xì)胞運(yùn)動和相互作用的一種技術(shù),具體來說,生物學(xué)家在培養(yǎng)皿中采集細(xì)胞樣本,并在細(xì)胞平面上制造人工傷口,在開發(fā)人造傷口后,生物學(xué)家會定期拍攝任何細(xì)胞運(yùn)動的圖像,以開發(fā)出一系列用于分析的圖像。
在下面的教程中,我們將處理下面提供的圖像,因此在開始之前下載此圖像并將其添加到我們的項(xiàng)目目錄中。

從顯微鏡獲得的劃痕分析圖像
首先,我們需要確定我們要試圖做什么來處理此圖像,為了從該圖像中獲得更多的信息,我們將使用各種分割技術(shù)來分離細(xì)胞區(qū)域和劃痕區(qū)域(空白區(qū)域)。如我們所見,由于整個圖像的像素值基本相同,因此我們不能僅根據(jù)顏色對該圖像進(jìn)行分割,但是我們可以使用紋理作為參數(shù)來確定培養(yǎng)皿的哪個區(qū)域有細(xì)胞,哪個區(qū)域沒有細(xì)胞。為此,在開始分割圖像之前,我們將對圖像應(yīng)用一個特殊的過濾器。
首先,讓我們將所有必要的庫導(dǎo)入我們的 Python 腳本:

然后,導(dǎo)入我們上面提供的圖像,我們在下面的代碼片段中將圖像命名為“scratch.jpg”。

在上面的代碼中,我使用了scikit image中的io包來使用imread函數(shù),該函數(shù)允許我輸入圖像數(shù)據(jù),此函數(shù)的工作原理與用于 CSV 文件的 Pandas read_csv 方法完全相同。此外,我們使用了 scikit-image 的形態(tài)學(xué)包中的熵過濾器,這將允許我們通過搜索某些像素中的無序情況來分析圖像的紋理。如果小伙伴們想進(jìn)一步了解所有這些函數(shù)的功能和參數(shù),請?jiān)L問 scikit-image 文檔。我們可以使用磁盤參數(shù),但對于此圖像,磁盤值為 10 時可獲得最佳結(jié)果。

現(xiàn)在,我們將應(yīng)用Otsu閾值濾波器,該濾波器來自skiliage.filters包,這個簡單的單行命令將允許我們應(yīng)用Otsu閾值濾波器。Otsu閾值是一種特定算法,它迭代圖像中的每個像素并將像素分為兩類:背景和前景。一旦我們實(shí)際繪制了圖像,我們就會理解其效果。
閾值過濾器只返回單個數(shù)字,該值是 Otsu 算法為優(yōu)化圖像分割計(jì)算的精確值,將幫助我們生成最終圖像。


最后,在這里我們可以看到圖像分割的結(jié)果。在這段代碼中,我們定義了一個子圖,其中將顯示原始圖像、使用熵過濾器的圖像以及同時使用熵過濾器和 Otsu 過濾器的圖像。“帶 Otsu 過濾器的分段試驗(yàn)”圖像將是我們劃痕試驗(yàn)分析的最終結(jié)果,讓我們看看所有這些代碼的輸出:
正如我們在上面的圖像中看到的,熵過濾器在原始圖像中產(chǎn)生了巨大的變化,熵過濾器檢測圖像像素中的微小變化,并根據(jù)圖像某些區(qū)域的復(fù)雜性劃分像素。正如我們在第二張圖片中看到的,黑色條帶代表沒有細(xì)胞的區(qū)域,而灰色區(qū)域代表有細(xì)胞的區(qū)域。Otsu 過濾器通過實(shí)現(xiàn)一個閾值來鞏固這種分割,使我們能夠在劃痕分析的準(zhǔn)確時刻準(zhǔn)確地定位細(xì)胞的位置。

最后,我們可以打印代表檢測中無細(xì)胞區(qū)域的像素?cái)?shù),以便更好地了解細(xì)胞是如何隨著時間移動和增殖的。
這個具體的項(xiàng)目對于理解圖像處理的一些基本方面非常有用,由于所有像素具有相同的 RGB 值,因此在本教程中分析的圖像非常難以分割。然而,在熵過濾器的幫助下,我們能夠生成一個基于紋理處理的圖像,然后我們可以使用 Otsu 閾值來更深入地了解該時間點(diǎn)的細(xì)胞位置。
劃痕分析由一個時間序列組成,我們只分析了該時間序列中的一張圖像,生物學(xué)家在多個圖像中多次循環(huán)此過程,以生成細(xì)胞運(yùn)動的時間序列表示。當(dāng)他們?yōu)g覽每張圖像時,生物學(xué)家會記錄細(xì)胞運(yùn)動和位置的變化,這為他們提供更多有關(guān)細(xì)胞增殖率和細(xì)胞遷移模式的信息。
許多圖像處理過濾器需要復(fù)雜的高斯數(shù)學(xué)知識,而大多數(shù)人沒有這方面的經(jīng)驗(yàn),但是 scikit-image 消除了實(shí)現(xiàn)此類過濾器所需的高級數(shù)學(xué)知識。然而,對高斯核和其他此類計(jì)算工具的了解,可以讓研究人員獲得預(yù)包裝軟件能夠提供的更準(zhǔn)確的可視化效果。
我在下面添加了完整的代碼要點(diǎn)。
In [ ]:from skimage.filters.rank import entropyfrom skimage.morphology import diskfrom skimage.filters import threshold_otsufrom skimage import ioimport matplotlib.pyplot as pltimport numpy as npimport skimageIn [ ]:img = io.imread('images/scratch.jpg') # Reading Imageentropy_img = entropy(img, disk(10)) # Applying entropy filter for better segmentationIn [ ]:thresh = threshold_otsu(entropy_img) # Applying Otsu filter for optimal thresholdingIn [ ]:# Creating image in which all pixels with value less than threshold is equal to truebinary = entropy_img <= thresh # Composed of 0s and 1s (False and True)In [ ]:# Displaying Imagesfig, ax = plt.subplots(nrows=1, ncols=3, figsize=(12,10))ax[0].imshow(img)ax[0].set_title("Original Assay")ax[1].imshow(entropy_img)ax[1].set_title("Assay w/ Entropy Filter")ax[2].imshow(binary)ax[2].set_title("Segmented Assay w Otsu Filter")In [ ]:print(np.sum(binary == 1)) # the number of pixels that correspond to the clear space in the assay
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